純化蛋白質等大分子物質的工具——干型透析袋
01
透析
透析，一種小分子能夠在半透膜上的孔自由通過，大分子不能通過該孔而被截留在半透膜內，實現大分子物質和小分子物質分離純化的實驗方法；
透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內，而鹽和小分子物質不斷擴散透析到袋外，直到袋內外兩邊的濃度達到平衡為止。
保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”
02
透析分離物質的優缺點
優點
樣品回收率高；操作簡單，無需繁瑣準備工作；分離條件溫和。
缺點
耗時較長；樣品和雜質之間的分子量差較大。
03
干型透析袋使用方法
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1
剪取適當長度的透析袋（如10cm）；
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2
在大體積（500ml）的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA.2Na (pH 8.0)中，將其煮沸10分鐘；
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3
取出后用蒸餾水徹底清洗透析袋；
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4
再放在500ml的1mmol/L EDTA.2Na(pH 8.0)中將其煮沸10分鐘，取出后再用蒸餾水徹底清洗；
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5
暫不使用的話需要將透析袋完全浸泡到透析袋儲存液中，可存放于4-37度；
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6
浸泡在透析袋儲存液中的透析袋取出使用前，須將透析袋內裝滿水然后排出，將之清洗干凈，內外沖洗三次方可。
小提示：實驗要求不高的可以用簡易處理方法，即在沸水中煮10min即可使用。
04
下述透析程序是一個普遍的基礎透析過程
在開始透析之前應考慮到許多變數。透析樣品溶劑、膜的化學相容性、膜的截留分子量，透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會影響透析速率，因此，一些應用中下述透析過程可能需要適當的變化。
1.把適量的透析液（緩沖液）加入透析裝置；
2.裁剪適當長度的透析管，預留一段額外長度；
3.把透析管插入打開的透析夾，在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋；
4.由透析管開口端將樣品裝入。調整一下頂部空間的長度，夾緊透析夾；
5.把透析樣品放在合適的透析緩沖液中；
6.透析要根據具體的應用需求。通常情況下，允許過夜透析。在持續透析的過程中，至少要進行3次全部更換透析液。建議在（透析后）2-4小時，6-8小時和10-14小時（第2天早晨）更換透析液。在最后一次透析液的更換后要至少繼續進行2小時的透析。
05
使用注意事項
a.透析袋不可以長期浸泡在純水中，易被污染；
b.樣品濃度不可太大；
c.樣品和透析液體積比一般是1:50~500；
d.樣品濃度越高，透析所需時間越長，透析液需要更頻繁的更換；
e.在適當的儲存情條件下，保質期為兩年。（備注：一旦變潮濕，不要讓透析袋干燥，會造成孔隙結構不可恢復的倒塌）。
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