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支原體污染

       支原體是一類缺乏細(xì)胞壁呈高度多形性的原核細(xì)胞型微生物,大小為0.1~0.3微米所以除菌濾器無法正常對支原體進行濾除,是目前所知能在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖的最小的微生物。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達到63%,當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變,而細(xì)胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響,因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺。

                       

支原體污染的影響:

1、影響細(xì)胞的生長狀態(tài)及形態(tài)

支原體可使培養(yǎng)液中支持細(xì)胞生長的營養(yǎng)物質(zhì)含量減少,造成細(xì)胞生長緩慢甚至停止;細(xì)

胞狀態(tài)變差,生長變慢,在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。會導(dǎo)

致細(xì)胞微管解聚,引起細(xì)胞一系列病變,表現(xiàn)為細(xì)胞收縮、貼壁細(xì)胞脫落、裂解等。細(xì)胞傳

代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點,細(xì)胞空泡化,很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞,最終細(xì)胞漂浮,完全

死亡。

2.影響細(xì)胞的代謝和功能

培養(yǎng)液中的精氨酸被支原體大量消耗,引起細(xì)胞蛋白質(zhì)、DNA、rRNA、mRNA的合成障礙;支原體活動使培養(yǎng)基成分發(fā)生改變,影響細(xì)胞代謝;支原體吸附在細(xì)胞表面,破壞細(xì)胞膜的完整性,影響細(xì)胞信號傳遞;支原體消耗細(xì)胞的核苷庫—染色體異常。

3、其他

此外,支原體污染還會影響一些病毒在細(xì)胞中的產(chǎn)量、使惡性細(xì)胞致癌能力下降、影響

淋巴細(xì)胞分化等。


支原體污染來源:

包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。

 

預(yù)防及處理:

控制環(huán)境污染、嚴(yán)格實驗操作、細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌、在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。


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